第二代多肽合成儀誕生在上世紀(jì)八十年代。
代表產(chǎn)品是Protein Technologies公司推出的PS3 Peptide Synthesizer以及Advanced ChemTech公司推出的ACT peptide synthesizer Model 90。
標(biāo)志性特點(diǎn)是溫和反應(yīng)法合成多肽,一般可分為單純氮?dú)夤呐莺蛽u動(dòng)式兩種。第二代多肽合成儀PS3 的設(shè)計(jì)原理是采用氮?dú)夤呐莸姆磻?yīng)方式來對(duì)反應(yīng)物進(jìn)行攪拌,即合成儀上反應(yīng)器是固定的,氮?dú)鈴姆磻?yīng)器的下方通過反應(yīng)器到上部排出,在這一過程中產(chǎn)生的汽泡把固相和液相混合起來。
這樣設(shè)計(jì)的好處是結(jié)構(gòu)簡單,成本低,但反應(yīng)相對(duì)溫和:1)有時(shí)候多肽-固相載體在靜電作用下會(huì)"抱團(tuán)",使其不能與液相充分混合,在這種情況下需要調(diào)高氮?dú)獾膲毫σ韵o電作用;
而在靜電作用消除后要把壓力立刻調(diào)低,不然的話較高的壓力會(huì)把多肽-固相載體"吹"到反應(yīng)器液面上方。
由于多肽-固相載體具有較強(qiáng)的粘壁性,一旦被粘到反應(yīng)器液面上方就再也無法下來,也就是無法再參加反應(yīng)。顯然一代機(jī)器是無法自動(dòng)作這樣的壓力調(diào)整的,這就是造成反應(yīng)"死角"的重要原因。
反應(yīng)死角會(huì)降低多肽合成的效率和多肽的純度,有的甚至造成合成的失敗。
2)長時(shí)間氮?dú)夤呐輹?huì)使溶液揮發(fā),液面降低后一部分多肽-固相載體就粘在液面上方,也無法再參加反應(yīng)。
3)氮?dú)庀牧看?,運(yùn)行成本增大。 A
CT90的設(shè)計(jì)原理是反應(yīng)器在直立下圍繞原點(diǎn)作左右擺動(dòng),或者圓周運(yùn)動(dòng)。ACT的多肽合成儀同樣具有反應(yīng)溫和的特點(diǎn),即轉(zhuǎn)動(dòng)角度與速度都不能夠*達(dá)到氨基酸耦合的極限,反應(yīng)往往需要更長的時(shí)間。